SAMANTEKT OG SKÝRINGAR PRÓFINN
Malaría er moskítóberandi, blóðlýsandi, hitasjúkdómur sem smitar yfir 200 milljónir manna og drepur meira en 1 milljón manns á ári.Það stafar af fjórum tegundum Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale og P. malariae.Þessar blóðsýkingar sýkja allar og eyða rauðkornum manna og valda kuldahrolli, hita, blóðleysi og miltisstækkun.P. falciparum veldur alvarlegri sjúkdómi en aðrar blóðvökvategundir og veldur flestum malaríudauða.P. falciparum og P. vivax eru algengustu sjúkdómsvaldarnir, þó er töluverður landfræðilegur munur á tegundadreifingu.
Hefð er fyrir því að malaría er greind með því að sýna lífverurnar á Giemsa lituðum þykkum strokum af útæðablóði og mismunandi tegundir plasmodiums eru aðgreindar með útliti þeirra í sýktum rauðkornum1.Tæknin er fær um nákvæma og áreiðanlega greiningu, en aðeins þegar hún er framkvæmd af færum smásjárfræðingum með því að nota skilgreindar samskiptareglur2, sem skapar miklar hindranir fyrir afskekkt og fátæk svæði heimsins.
Malaríu Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit er þróað til að leysa þessar hindranir.Prófið notar par af einstofna og fjölstofna mótefnum gegn P. falciparum sértæku próteini, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II), og par af einstofna mótefnum gegn plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH), prótein framleitt af fjórum tegundum plasmodium, gerir þannig kleift að greina og aðgreina sýkingu samtímis með P. falciparum og eða einhverjum af hinum þremur plasmodia.Það er hægt að framkvæma af óþjálfuðu eða lágmarkshæfu starfsfólki, án rannsóknarstofubúnaðar.
MEGINREGLA
Pf/Pan Malaria hraðprófunarsettið er hliðarflæðisskiljun ónæmisgreiningar.Hlutar prófunarstrimlanna samanstanda af: 1) vínrauðum lituðum samtengdum púða sem inniheldur músa and-pHRP-II mótefni tengt kolloidgull (pHRP II-gullsambönd) og músa and-pLDH mótefni tengt við colloid gulli (pLDH-gullsambönd),
2) nítrósellulósahimnuræma sem inniheldur tvö prófunarbönd (Pan og Pv band) og viðmiðunarband (C band).Pan band er forhúðað með einstofna and-pLDH mótefni þar sem hægt er að greina sýkingu með einhverri af fjórum tegundum plasmodia, Pf bandið er forhúðað með fjölstofna and-pHRP-II mótefnum til að greina Pf sýkingu, og C bandið er húðað með IgG gegn músum úr geitum.
Á meðan á greiningu stendur er nægilegu rúmmáli af blóðsýninu dreift í sýnisholuna (S) á prófunarhylkinu, lýsisjafnalausn er bætt við biðminnisholuna (B).Stuðpúðinn inniheldur þvottaefni sem leysir rauðu blóðkornin og gefur frá sér ýmsa plasmodíum mótefnavaka, sem flytjast með háræðavirkni yfir ræmuna sem geymd er í snældunni.Ef pHRP-II er til staðar í sýninu mun það bindast pHRP II-gullsamböndunum.Ónæmisfléttan er síðan tekin á himnuna af forhúðuðu and-pHRPII mótefnum, sem myndar vínrauða litaða Pf band, sem gefur til kynna Pf jákvæða niðurstöðu.pLDH ef það er til staðar í sýninu mun bindast pLDH gullsamböndunum.Ónæmisfléttan er síðan tekin á himnuna af forhúðuðu and-pLDH mótefninu, sem myndar vínrauða litaða Pan band, sem gefur til kynna jákvæða niðurstöðu úr plasmaprófi.Ef Pan band er ekki til staðar er hægt að mæla með jákvæðri niðurstöðu fyrir einhverja hinna þriggja plasmodia.
Skortur á prófunarböndum (Pan og Pf) bendir til neikvæðrar niðurstöðu.Prófið inniheldur innra eftirlit (C band) sem ætti að sýna vínrauða litaða ónæmisfléttu geitamótmúsa IgG / músa IgG (pHRP-II og pLDH-gull samtengingar) óháð litaþróuninni á einhverju prófunarböndunum .Annars er prófunarniðurstaðan ógild og sýnishornið verður að prófa aftur með öðru tæki.
